缺血性腦病是目前危害人類(lèi)健康的重要病癥。對于腦血流以及腦血管微循環(huán)的研究成為腦血管疾病研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)。但由于腦部結構的特殊性,軟腦膜微血管研究成為腦血流研究的理想選擇。
使用Gene&I-MC1微血管分析系統,可對動(dòng)物軟腦膜進(jìn)行清晰成像,并得到軟腦膜血管的動(dòng)態(tài)變化。通過(guò)對圖像的處理分析,獲取軟腦膜血管的管徑、白細胞粘附、紅細胞速度、血管損傷等參數。對于研究腦血管藥物的藥效或者腦部疾病發(fā)病機制具有很大的幫助作用。
本例以?xún)绕に貋?lái)觀(guān)察大鼠軟腦膜上細動(dòng)脈痙攣現象。
實(shí)驗具體操作如下:
實(shí)驗動(dòng)物:wistar大鼠,雄性,提供250g左右
實(shí)驗儀器:Gene&I-MC1微血管分析系統
試劑:內皮素、20%烏拉坦
器材:手術(shù)剪刀、小彎鑷、眼科剪、縫合線(xiàn)、顱骨鉆
具體操作
1.20%烏拉坦肌肉注射麻醉大鼠。
2.大鼠俯臥,使用專(zhuān)用的腦部固定裝置固定大鼠頭部。去掉大鼠顱骨表面皮毛,暴露顱骨。使用顯微鑷去掉顱骨表面筋膜。使用顱骨鉆沿骨縫內側磨薄一矩形區域,面積5mm×5mm.至手感骨片浮動(dòng)時(shí),使用彎鑷提起骨片,去掉。暴露軟腦膜表面。
3.將暴露的大鼠軟腦膜表面置于Gene&I-MC1微血管分析系統鏡頭下,選取20-40μm寬,200μm長(cháng)的細動(dòng)脈,進(jìn)行微血管的觀(guān)察。并進(jìn)行動(dòng)態(tài)視頻錄制。
4.細動(dòng)脈痙攣:在軟腦膜表面添加4-5滴內皮素,再次對軟腦膜上的細動(dòng)脈觀(guān)察并進(jìn)行視頻錄制。
5.打開(kāi)分析軟件,將錄制的軟腦膜細動(dòng)脈視頻導入,分析軟腦膜細動(dòng)脈在滴加內皮素前后血管管徑、血細胞運動(dòng)速度的變化。